利用大肠杆菌发酵获得高产量可溶性蛋白质的研究

苗丹青

浏览次数：99次 下载次数：0次

【摘要】在大肠杆菌（E.coli）中表达目的基因，进而大规模生产可溶性蛋白质是基因工程研究中的一个重要环节。在本研究中，我们的目的是利用优化过后的大肠杆菌固定化发酵技术，以求得更高的目的蛋白质表达产量。首先，通过对大肠杆菌发酵过程中培养基成分、温度、pH 值以及溶氧等培养条件进行优化，最终确定最佳的发酵条件。在最优条件下，不仅可以保证大肠杆菌的高效生长，也可大幅度提高目的蛋白质产量。然后，我们通过十二烷基硫酸钠（SDS） - PAGE 以及葡聚糖（Sephadex）凝胶柱层析两种纯化方法对所得蛋白质进行纯化处理，从而得到高纯度的可溶性蛋白质。在此基础上，我们需要对所得到的蛋白质进行生化特性分析，以验证其活性。经过一系列的精细化工艺调控，最终可显著提高大肠杆菌目的蛋白质表达的产量，得到纯度高，活性强的目的蛋白质。本研究，可对工业生产中相关的生物技术提供新的实用方法和理论参考。
【关键词】大肠杆菌；发酵技术；可溶性蛋白质；基因工程；生化特性分析